RNA Chlam. trachomatis NASBA (соскоб) кач. в Чернушка

ОПИСАНИЕ

Определение РНК  Chlamydia trachomatis методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Хламидии (Chlamydia trachomatis) - облигатные внутриклеточные паразиты, вызывающие хламидиоз (в первую очередь, поражения слизистых оболочек половых путей, конъюнктивиты). Достаточно широко распространённая инфекция, может протекать бессимптомно, часто хронизируется, сопровождается различными осложнениями, которые иногда у женщин являются причиной бесплодия и невынашивания беременности. Особенности жизненного цикла Chlamydia trachomatis приводят к частому возникновению персистирующей формы инфекции, резистентности к терапии. Реактивация инфекции может произойти под действием изменения иммунного или гормонального статуса, травмы, операции, стресса.

Инфекция передаётся половым, контактно-бытовым путём. Инкубационный период от момента заражения до появления первых симптомов заболевания продолжается от 7 до 20 дней и более. У женщин хламидийная инфекция чаще всего протекает в виде воспаления канала шейки матки, откуда оно переходит в полость матки и маточные трубы. Воспаление маточных труб (сальпингит) является самым распространенным осложнением хламидиоза и может приводить к непроходимости маточных труб и в итоге к бесплодию или трубной (внематочной) беременности. Особенность хламидиоза придатков матки заключается в склонности к отсутствию специфических симптомов болезни и длительному течению. В некоторых случаях инфекция распространяется выше, на органы брюшной полости.От 5 до 20 % беременных женщин имеют хламидийную инфекцию канала шейки матки. Примерно половина детей, которые рождаются у них, инфицируется во время родов. У половины инфицированных детей развивается хламидийный конъюнктивит, у 10 % может быть воспаление легких. У мужчин хламидиоз может протекать как воспаление мочеиспускательного канала (уретрит), семявыводящих протоков (эпидидимит). Иногда происходит воспаление предстательной железы (простатит).

Лабораторная диагностика хламидийной инфекции включает в себя комплекс методов исследования. Традиционно, выделяют две группы методов:

- непрямые – выявление антител, специфичных к антигенам возбудителя, в сыворотке крови больного;

- прямые - выявление возбудителя или его ДНК/РНК в материале от больного;

Определение специфических антител к Chlamydia trachomatis является вспомогательным методом при диагностике урогенитальноо хламидиоза, это связано с тем, что особенности строения и цикла развития Chlamydia trachomatis обусловливают его низкую иммуногенность, вследствие чего у 50% инфицированных антитела в сыворотке крови не обнаруживаются. Поэтому (особенно в сомнительных случаях, при отсутствии сероконверсии) микроорганизм выявляют высокочувствительным и специфичным прямым методом – ПЦР. Кроме амплификации ДНК, все большее внимания привлекают методы амплификации РНК, к которым относится транскрипционный метод амплификации – под названием «NASBA» (Nucleic Acid Sequence-Based Amplificaition). Мишенью для NASBA служат молекулы РНК рибосом (рибосомальные РНК) микроорганизмов, что дает целый ряд преимуществ перед ПЦР:

1. Количество рибосом в одной клетке хламидии содержится от нескольких тысяч до нескольких десятков тысяч. Для сравнения: многокопийные участки ДНК, используемые в качестве мишени для ПЦР, не превышают двух десятков на бактериальную клетку. То есть с помощью NASBA можно выявлять возбудителей  в тех случаях, когда их количество слишком мало и недостаточно для выявления методом ПЦР.

2. ДНК – достаточно стабильный материал и обнаружение ДНК еще не означает наличие жизнеспособных микроорганизмов РНК – наоборот крайне нестабильный материал и достаточно быстро деградирует при гибели и разрушении клеток микроорганизмов. Это дает возможность не только более правильно судить о наличии текущей инфекции, но и более точно и надежно оценивать результаты проведенного лечения.

3. NASBA может использоваться как подтверждающий тест результатов ПЦР, особенно на фоне отсутствия клинических признаков инфекции.

РНК возбудителя является более ранним маркером ответа на терапию, поэтому с помощью метода NASBA можно оценивать эффективность лечения через 1-2 недели после окончания курса терапии.

ПОДГОТОВКА К ИССЛЕДОВАНИЮ

При исследовании соскобов из уретры, забор материала проводят до или не ранее 2 - 3 часов после мочеиспускания. Женщинам исследование (процедуру забора урогенитального мазка) рекомендуется проводить до менструации или через 2 дня после её окончания. За 1-2 дня и в день обследования не рекомендуется выполнять спринцевание влагалища и использовать вагинальные свечи. Также не рекомендуется взятие биоматериала ранее 24 - 48 часов после полового контакта, интравагинального УЗИ и кольпоскопии.

Сбор мочи проводится после тщательного туалета наружных половых органов. Не следует производить сбор мочи во время менструации. Для анализа отбирают первую порцию утренней мочи в количестве 15−25 мл в стерильный контейнер.

При исследовании эякулята необходимо половое воздержание в течение 1-2 дней.

Соскобы из глотки  берутся натощак (через 2-3 часа после последнего приема пищи).

Не рекомендуется взятие любого биоматериала на фоне проведения антибактериальной терапии.

 

Материал для исследования: Выбор материала для исследования зависит от клинической  формы заболевания  и локализации поражений:

• нижние отделы мочеполового тракта – соскобы со слизистых оболочек уретры, моча;
• верхние отделы мочеполового тракта – соскоб со слизистой оболочки канала шейки матки, секрет простаты, эякулят;
• хламидийный фарингит – соскоб со слизистой задней стенки глотки;
• хламидийный конъюнктивит – соскоб со слизистой конъюнктивы.

 

ПОКАЗАНИЯ

• Диагностика инфекции, вызванной Chlamydia trachomatis.
• Установление этиологии хронического инфекционного процесса урогенитального тракта, в том числе его верхних отделов, возможность обнаружить единичные молекулы РНК клетки хламидий, не выявляемые другими методами.
• Контроль эффективности терапии.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

Интерпретация результатов содержит аналитическую информацию для лечащего врача. Лабораторные данные входят в комплекс всестороннего обследования пациента, проводимого врачом и не могут быть использованы для самодиагностики и самолечения.

Лечащий врач определяет тип биоматериала для исследования.

 

Тест является качественным. Результат выдаётся в терминах «обнаружено» или «не обнаружено».

 «не обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала не найдено фрагментов РНК, специфичных для Chlamydia trachomatis.

 

«обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала найден фрагмент РНК, специфичный для Chlamydia trachomatis.