Антинуклеарные антитела, IgG (анти-Sm, RNP/Sm, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, dsDNA, CENT-B, Jo-1, к гистонам, к нуклеосомам, Ribo P, AMA-M2), иммуноблот в Пермь

ОПИСАНИЕ

Определение антинуклеарных антител в сыворотке крови методом иммуноблота.

Антинуклеарные антитела (АНА) представляют собой семейство аутоантител специфичных к различным компонентам клеточного ядра, они встречаются более чем у 90% больных с системными заболеваниями соединительной ткани, такими как системная красная волчанка синдром Шегрена, полимиозит, дерматомиозит. В настоящее время описано около 200 разновидностей АНА, направленных против нуклеиновых кислот, гистонов, белков ядерной мембраны, рибонуклеопротеинов, белков ядрышек и центромер. В связи с редкой встречаемостью не все разновидности антител используются для клинической диагностики.

Иммуноблот антинуклеарных антител позволяет одновременно в одном тесте провести исследование 14 основных разновидностей антинуклеарных антител:

Аутоантитела к антигену Sm (Анти-Sm);

Аутоантитела к антигену nRNP/Sm;

Аутоантитела к антигену SS-A;

Аутоантитела к антигену SS-B;

Аутоантитела к антигену Scl-70;

Аутоантитела к антигену PM-Scl;

Аутоантитела к антигену PCNA;

Аутоантитела к антигену dsDNA;

Аутоантитела к антигену CENT B;

Аутоантитела к антигену Jo-1;

Аутоантитела к гистонам;

Аутоантитела к нуклеосомам;

Аутоантитела к рибосомальному белку P (Ribo P);

Аутоантитела к AMA-M2.

 

Анти-Sm – антитела к U1-, U2-, U4-рибонуклеопротеинам – специфичный маркер системной красной волчанки (СКВ), входит в 10-ый критерий СКВ Американского колледжа ревматологов (АСR). При этом уровень анти-Sm не коррелирует с активностью системной красной волчанки. Данные антитела редко встречаются при других системных заболеваниях соединительной ткани.

Антитела к антигенам nRNP (anti-ribonucleoprotein) – антитела к белковым компонентам малого ядерного нуклеотида – U-1-РНК. Они обнаруживаются при смешанных заболеваниях соединительной ткани (синдроме Шарпа), реже при системной красной волчанке и других ревматических заболеваниях.

Антитела к SS-A направлены на белки, связанные с РНК Y1-Y5 в составе сплайсосомы. Эти антитела наиболее часто обнаруживаются при синдроме Шегрена и системной красной волчанке.

Анти SS-A (Ro52) чаще обнаруживается при системной красной волчанке и ее кожных формах, системных ревматических заболеваниях, ревматоидном артрите, аутоиммунных заболеваниях печени.

Анти-SS-A (Ro60) отмечаются при классической системной красной волчанке (обычно с другими антителами), изолированно могут обнаруживаться при кожных формах красной волчанки, фоточувствительности. При выявлении антител к SSA у беременной, которая больна СКВ, обнаружение антител указывает на высокий риск врожденной красной волчанки у новорожденного. Основной серологический показатель при синдроме Шегрена. Нередко антитела выявляются совместно с антителами к SS-A (Ro52) антигену.

Анти-SS-B - антитела к белку, связанному с РНК-полимеразой-3, выявляются при болезни Шегрена и в начальном периоде системной красной волчанки, развивающейся в пожилом возрасте и ассоциирующейся с низкой частотой развития нефрита.

Антитела к Scl-70 (антисклеродермальные антитела с молекулярной массой 70 кДа, антитела к топоизомеразе I) чаще появляются при диффузной (40 %), реже при ограниченной (20 %) форме системной склеродермии, CREST-синдроме. Эти антитела высокоспецифичны для склеродермии и являются плохим прогностическим признаком относительно развития легочного фиброза.

Антитела anti-PM/Scl – серологический маркер склеродермии (Scl), полимиозита (PM) он специфичен для пациентов, у которых наблюдается совокупность симптомов обоих заболеваний (PM/Scl).

Антитела к PCNA (антитела к ядерному антигену пролиферирующих клеток) – один из высокоспецифичных тестов для выявления системной красной волчанки.

Анти-dsDNA - антитела к двухцепочечной ДНК специфичны для системной красной волчанки. Обнаружение анти-dsDNA является одним из критериев постановки диагноза СКВ.

Анти-CENT-B (антицентромерные антитела) обнаруживаются у больных склеродермией, системной красной волчанкой и ревматоидным артритом. У больных системной склеродермией выявление данных антител указывает на благоприятный прогноз и низкую вероятность поражения внутренних органов.

Анти-Jo-1-антитела (антитела к гистидин-тРНК-синтетазе) впервые были обнаружены в сыворотке крови больных миозитом. У большинства больных с повышенным уровнем антисинтетазных антител выявляется интерстициальная болезнь легких, феномен Рейно. Данное исследование может быть использовано как прогностический маркер прогрессирования болезни.

Антитела к гистонам представляют собой одну из разновидностей антитуклеарных антител и определяются в основном при системной красной волчанке, являются ее ранними маркерами.

Антитела к нуклеосомам – чувствительный маркер системной красной волчанки, определяются исключительно при СКВ, нередко осложненной поражением почек (люпус-нефритом).

Антитела к рибосомальному белку Р встречаются у 10-20 % больных с СКВ. Они взаимодействуют с фосфоропротеинами рибосом и встречаются преимущественно у больных СКВ с поражением центральной нервной системы, почек и печени. Их обнаружение специфично для СКВ, протекающей с волчаночным психозом.

Анти-AMA-M2 – антитела к антигенам митохондрий М-2, расположенным на внутренней мембране органеллы в виде комплекса ферментов. Данные антитела синтезируются при первичном билиарном циррозе и указывают на его тяжелое течение.

Некоторые разновидности АНА встречаются при одном заболевании или при перекрестных синдромах. Например, антитела к SS-A и SS-B или к RNP и Sm-антигенам часто выявляются совместно, поскольку входят в один белковый комплекс, выступающий антигеном для данных типов аутоантител.

Данное исследование предполагает проведение дифференциальной диагностики в пределах основных системных ревматических заболеваний. Каждая разновидность аутоантител, выявляемая с помощью иммуноблота, обычно отмечается у пациентов с характерной клинической картиной, поэтому спектр аутоантител позволяет не только диагностировать заболевание, а также установить риск развития определенных симптомов заболевания.

Иммуноблот антинуклеарных антител целесообразно использовать на втором этапе серологического обследования при положительном результате других тестов, указывающих на присутствие в сыворотке крови антинуклеарных антител. К таким тестам относится выявление антинуклеарного фактора (АНФ), антинауклеарных антител.

 

ПОДГОТОВКА К ИССЛЕДОВАНИЮ

Кровь рекомендуется сдавать утром, не ранее, чем через 4 часа после последнего приема пищи (воду пить можно).

 

Материал для исследования: сыворотка крови.

 

ПОКАЗАНИЯ

• Второй этап серологического обследования при диагностике и дифференциальной диагностике системных заболеваний соединительной ткани при положительном результате других тестов, указывающих на присутствие в сыворотке крови антинуклеарных антител.
• Оценка эффективности терапии аутоиммунных заболеваний.
• Мониторинг течения и оценка прогрессирования заболеваний соединительной ткани.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

Интерпретация результатов содержит аналитическую информацию для лечащего врача. Лабораторные данные входят в комплекс всестороннего обследования пациента, проводимого врачом и не могут быть использованы для самодиагностики и самолечения.

 

Тест является качественным, результат может быть представлен в форме «обнаружено» или «не обнаружено».  При обнаружении полосы, характеризующей наличие какого-либо вида антител, интенсивность окраски полосы дополнительно описывают количеством плюсов («крестов») для каждого из выявленных видов антител:

«+» - низкое содержание аутоантител к специфическому антигену;

«++» - среднее содержание аутоантител к специфическому антигену;

«+++» - высокое содержание аутоантител к специфическому антигену.

Возможно обнаружение в одном биоматериале нескольких специфических разновидностей антинуклеарных антител.

Некоторые лекарственные препараты: аминосалициловая кислота, изониазид, метилдопа, пенициллин, пропилтиоурацил, стрептомицин, тетрациклин способны повышать уровень Scl-70. Антитела к гистонам могут появляться при лекарственной волчанке, вызванной приемом гидралазина, прокаинамида, хинидина.

Результаты данного исследования необходимо интерпретировать комплексно, в сочетании с клиническими данными. Системное аутоиммунное заболевание при отсутствии клинической картины не может быть диагностировано только на основании выявления специфичных антинуклеарных антител. Отрицательный результат иммуноблота не исключает системного аутоиммунного заболевания соединительной ткани.