Исследование кариотипа (количественные и структурные аномалии хромосом) по лимфоцитам периферической крови (1 человек) в Лысьва

ОПИСАНИЕ

Кариотипирование – цитогенетическое исследование, которое проводится с целью  выявления нарушений количества и структуры хромосом человека. Оно помогает выявить нарушения хромосом, вероятно, не влияющие на здоровье человека, но тем не менее важные для планирования будущей беременности и для здоровья будущего ребенка (патологии плода, аномалии развития).

Кариотип – это полный хромосомный набор клетки человека. В норме он состоит из 46 хромосом, из них 44 аутосомы (22 пары), имеющих одинаковое строение и в мужском, и в женском организме, и одна пара половых хромосом (XY у мужчин и XX у женщин). Каждая хромосома несет гены, ответственные за наследственность. Кариотип 46, ХХ – соответствует нормальному женскому кариотипу, а кариотип 46, XY – это нормальный мужской кариотип. Кариотип остается неизменным в течение всей жизни.

Нарушения хромосомного набора могут являться причиной наследственной патологии, бесплодия, невынашивания беременности, рождения ребенка с различными пороками развития.

Для цитогенетического исследования хромосом чаще всего используют препараты кратковременной культуры крови, реже клетки костного мозга и культуры фибробластов.

Кариотипирование культуры лимфоцитов периферической крови человека – сложное многоступенчатое цитогенетическое исследование, проводится, когда клетки входят в фазу митоза – непрямого деления с тождественным распределением генетического материала между дочерними клетками. Оно включает в себя следующие этапы:

1. Постановка культуры лимфоцитов, рост клеток в течение 72 часов. Рост клеток может быть осложнен различными факторами: наличие инфекционных, хронических, простудных заболеваний, прием лекарственных препаратов, диета, прием алкоголя. Все эти факторы необходимо исключить перед сдачей анализов.
2. Обработка культур лимфоцитов: колхицинизация, гипотонизация, фиксация.
3. Приготовление препаратов хромосом на стекле.
4. Монохромное и дифференциальное окрашивание препарата.
5. Анализ препаратов (подсчитывается  общее количество хромосом, проводится оценка структуры каждой хромосомы). Анализ хромосом осуществляется на разрешении в 400-500 полос (бэндов). Различают несколько видов нарушений структуры хромосом:

•   трисомии – добавление еще одной хромосомы к паре;
•   моносомии – утрата одной хромосомы из пары;
•   делеции – утрата участка хромосомы;
•   дупликации – повторение определенного участка хромосомы;
•   инверсии – поворот участка хромосомы на 180 градусов;
•   транслокации – перенос участков хромосомы в новое положение.

Хромосомные нарушения различаются также по принципу регулярности. Регулярные мутации присутствуют при делении каждой клетки или большинства клеток. Они проявляются в момент зачатия плода либо в первые несколько дней беременности. Нерегулярные аберрации появляются в результате негативного воздействия радиации, химических средств. Нарушение расхождения хромосом может произойти во время клеточного деления (мейоза). Если такое нарушение происходит в процессе образования сперматозоидов или яйцеклеток, то в половой клетке появляется лишняя хромосома, которая при зачатии будет передана ребенку. В результате она будет присутствовать во всех клетках организма ребенка. Примером трисомии может служить синдром Дауна (лишняя 21-я хромосома) или синдром Патау (трисомия 13-й хромосомы). Также нарушение расхождения хромосом может произойти при первых делениях оплодотворенной яйцеклетки. Например, утрата Х-хромосомы приводит к развитию Х0-синдрома, или синдрома Шерешевского – Тернера. Аномалии, связанные с нарушением расхождения хромосом, встречаются не так часто, поэтому вероятность их повторения в одной и той же семье достаточно мала. Структурные нарушения хромосом передаются по наследству, при этом степень семейного риска и дальнейшая передача дефекта от поколения к поколению становится значительно высокой. Кариотипирование также рекомендуют проводить в тех семьях, где есть высокая вероятность рождения ребенка с болезнью, сцепленной с Х-хромосомой. 

ПОДГОТОВКА К ИССЛЕДОВАНИЮ

Исследование проводится в состоянии сытости, не рекомендуется сдавать кровь на данное исследование натощак. По согласованию с врачом необходимо исключить прием антибактериальных и химиотерапевтических препаратов в течение 14 дней до исследования. Исследование рекомендуется проводить не ранее чем через 2 недели после перенесенных инфекционных или острых воспалительных заболеваний.

Материал для исследования: цельная кровь

ПОКАЗАНИЯ

Показания для кариотипирования супружеских пар:

• мужское бесплодие: тяжелая олигозооспермия, необструктивная азооспермия, тератозооспермия;
• первичная аменорея;
• привычное невынашивание беременности в первом триместре (2 и более выкидышей);
• наличие выкидышей неясного генеза в анамнезе;
• случаи мертворождений в анамнезе;
• случаи ранней младенческой смертности в анамнезе;
• рождение детей с хромосомной аномалией (например, синдромом Дауна);
• рождение детей с множественными врождёнными пороками развития;
• планирование экстракорпорального оплодотворения (ЭКО);
• неудачные попытки ЭКО;
•    прогноз здоровья будущего ребенка.

Показания для кариотипирования детей:

• наличие врождённых пороков развития;
• умственная отсталость;
• задержка психомоторного развития;
• задержка психо-речевого развития в сочетании с микроаномалиями;
• нарушение или задержка полового развития;
• задержка роста;
• аномалии пола.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

Интерпретация результатов содержит аналитическую информацию для лечащего врача. Лабораторные данные входят в комплекс всестороннего обследования пациента, проводимого врачом и не могут быть использованы для самодиагностики и самолечения.

В результатах анализов представлен тип и общее количество хромосом. Для мужчин нормальным считается кариотип 46, XY. Это означает, что определено 46 нормальных хромосом, в том числе X и Y хромосома. Для женщин нормальным считается кариотип 46, XX. Это означает, что определено 46 нормальных хромосом, в том числе две X хромосомы. Количество проанализированных метафаз представлены в квадратных скобках.

Нормальный кариотип человека выглядит следующим образом:

• 46, ХХ – нормальный кариотип женщины,
• 46, XY – нормальный кариотип мужчины,

- где первая цифра - это общее количество хромосом, а после запятой перечислены половые хромосомы. Количество проанализированных метафаз, а также метафаз, в которых выявлены мутации, записывается в квадратных скобках.

Для записи генетических аномалий существуют специальные правила, соответственно которым представляют результат исследования при выявлении  какой-либо мутации. Количественные аномалии хромосом записывают как их общее число, перечисление половых хромосом и номер отсутствующей или лишней хромосомы с соответствующим знаком минус или плюс. Для обозначения структурных аномалий используют специальные буквенные символы:

t - транслокация – участок одной хромосомы переносится на другую;

del - делеция – потеря участка хромосомы;

inv - инверсия – поворот участка хромосомы на 180 градусов;

После структурных аномалий указывают номер хромосомы, на которой они обнаружены, а также ее участок.

В случае выявления патологического кариотипа, необходима консультация медицинского генетика по результатам исследования для правильной его интерпретации.