ОПИСАНИЕ
Кариотипирование – цитогенетическое исследование, которое проводится с целью выявления нарушений количества и структуры хромосом человека. Оно помогает выявить нарушения хромосом, вероятно, не влияющие на здоровье человека, но тем не менее важные для планирования будущей беременности и для здоровья будущего ребенка (патологии плода, аномалии развития).
Кариотип – это полный хромосомный набор клетки человека. В норме он состоит из 46 хромосом, из них 44 аутосомы (22 пары), имеющих одинаковое строение и в мужском, и в женском организме, и одна пара половых хромосом (XY у мужчин и XX у женщин). Каждая хромосома несет гены, ответственные за наследственность. Кариотип 46, ХХ – соответствует нормальному женскому кариотипу, а кариотип 46, XY – это нормальный мужской кариотип. Кариотип остается неизменным в течение всей жизни.
Нарушения хромосомного набора могут являться причиной наследственной патологии, бесплодия, невынашивания беременности, рождения ребенка с различными пороками развития.
Для цитогенетического исследования хромосом чаще всего используют препараты кратковременной культуры крови, реже клетки костного мозга и культуры фибробластов.
Кариотипирование культуры лимфоцитов периферической крови человека – сложное многоступенчатое цитогенетическое исследование, проводится, когда клетки входят в фазу митоза – непрямого деления с тождественным распределением генетического материала между дочерними клетками. Оно включает в себя следующие этапы:
- Постановка культуры лимфоцитов, рост клеток в течение 72 часов. Рост клеток может быть осложнен различными факторами: наличие инфекционных, хронических, простудных заболеваний, прием лекарственных препаратов, диета, прием алкоголя. Все эти факторы необходимо исключить перед сдачей анализов.
- Обработка культур лимфоцитов: колхицинизация, гипотонизация, фиксация.
- Приготовление препаратов хромосом на стекле.
- Монохромное и дифференциальное окрашивание препарата.
- Анализ препаратов (подсчитывается общее количество хромосом, проводится оценка структуры каждой хромосомы). Анализ хромосом осуществляется на разрешении в 400-500 полос (бэндов). Различают несколько видов нарушений структуры хромосом:
- трисомии – добавление еще одной хромосомы к паре;
- моносомии – утрата одной хромосомы из пары;
- делеции – утрата участка хромосомы;
- дупликации – повторение определенного участка хромосомы;
- инверсии – поворот участка хромосомы на 180 градусов;
- транслокации – перенос участков хромосомы в новое положение.
Хромосомные нарушения различаются также по принципу регулярности. Регулярные мутации присутствуют при делении каждой клетки или большинства клеток. Они проявляются в момент зачатия плода либо в первые несколько дней беременности. Нерегулярные аберрации появляются в результате негативного воздействия радиации, химических средств. Нарушение расхождения хромосом может произойти во время клеточного деления (мейоза). Если такое нарушение происходит в процессе образования сперматозоидов или яйцеклеток, то в половой клетке появляется лишняя хромосома, которая при зачатии будет передана ребенку. В результате она будет присутствовать во всех клетках организма ребенка. Примером трисомии может служить синдром Дауна (лишняя 21-я хромосома) или синдром Патау (трисомия 13-й хромосомы). Также нарушение расхождения хромосом может произойти при первых делениях оплодотворенной яйцеклетки. Например, утрата Х-хромосомы приводит к развитию Х0-синдрома, или синдрома Шерешевского – Тернера. Аномалии, связанные с нарушением расхождения хромосом, встречаются не так часто, поэтому вероятность их повторения в одной и той же семье достаточно мала. Структурные нарушения хромосом передаются по наследству, при этом степень семейного риска и дальнейшая передача дефекта от поколения к поколению становится значительно высокой. Кариотипирование также рекомендуют проводить в тех семьях, где есть высокая вероятность рождения ребенка с болезнью, сцепленной с Х-хромосомой.
ПОДГОТОВКА К ИССЛЕДОВАНИЮ
Исследование проводится в состоянии сытости, не рекомендуется сдавать кровь на данное исследование натощак. По согласованию с врачом необходимо исключить прием антибактериальных и химиотерапевтических препаратов в течение 14 дней до исследования. Исследование рекомендуется проводить не ранее чем через 2 недели после перенесенных инфекционных или острых воспалительных заболеваний.
Материал для исследования: цельная кровь.
ПОКАЗАНИЯ
Показания для кариотипирования супружеских пар:
- мужское бесплодие: тяжелая олигозооспермия, необструктивная азооспермия, тератозооспермия;
- первичная аменорея;
- привычное невынашивание беременности в первом триместре (2 и более выкидышей);
- наличие выкидышей неясного генеза в анамнезе;
- случаи мертворождений в анамнезе;
- случаи ранней младенческой смертности в анамнезе;
- рождение детей с хромосомной аномалией (например, синдромом Дауна);
- рождение детей с множественными врождёнными пороками развития;
- планирование экстракорпорального оплодотворения (ЭКО);
- неудачные попытки ЭКО;
- прогноз здоровья будущего ребенка.
Показания для кариотипирования детей:
- наличие врождённых пороков развития;
- умственная отсталость;
- задержка психомоторного развития;
- задержка психо-речевого развития в сочетании с микроаномалиями;
- нарушение или задержка полового развития;
- задержка роста;
- аномалии пола.
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Интерпретация результатов содержит аналитическую информацию для лечащего врача. Лабораторные данные входят в комплекс всестороннего обследования пациента, проводимого врачом и не могут быть использованы для самодиагностики и самолечения.
В результатах анализов представлен тип и общее количество хромосом. Для мужчин нормальным считается кариотип 46, XY. Это означает, что определено 46 нормальных хромосом, в том числе X и Y хромосома. Для женщин нормальным считается кариотип 46, XX. Это означает, что определено 46 нормальных хромосом, в том числе две X хромосомы. Количество проанализированных метафаз представлены в квадратных скобках.
Нормальный кариотип человека выглядит следующим образом:
- 46, ХХ – нормальный кариотип женщины,
- 46, XY – нормальный кариотип мужчины,
- где первая цифра - это общее количество хромосом, а после запятой перечислены половые хромосомы. Количество проанализированных метафаз, а также метафаз, в которых выявлены мутации, записывается в квадратных скобках.
Для записи генетических аномалий существуют специальные правила, соответственно которым представляют результат исследования при выявлении какой-либо мутации. Количественные аномалии хромосом записывают как их общее число, перечисление половых хромосом и номер отсутствующей или лишней хромосомы с соответствующим знаком минус или плюс. Для обозначения структурных аномалий используют специальные буквенные символы:
t - транслокация – участок одной хромосомы переносится на другую;
del - делеция – потеря участка хромосомы;
inv - инверсия – поворот участка хромосомы на 180 градусов;
После структурных аномалий указывают номер хромосомы, на которой они обнаружены, а также ее участок.
В случае выявления патологического кариотипа, необходима консультация медицинского генетика по результатам исследования для правильной его интерпретации.