ОПИСАНИЕ
Цель данного исследования - количественное определение в крови специфических иммуноглобулинов класса E, появляющихся при наличии аллергической реакции на стафилококковый энтеротоксин TSST, методом ImmunoCAP.
Стафилококки продуцируют энтеротоксины, которые являются факторами патогенности и играют важную роль во всех заболеваниях, вызываемых стафилококками. Помимо своей основной функции, почти все энтеротоксины вызывают аллергические реакции. Основными продуцентами стафилококковых энтеротоксинов (CЭ) являются штаммы золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus). Однако, в последнее время, ряд исследований показал, что энтеротоксины способны вырабатывать и другие виды стафилококков, в частности, штаммы эпидермального стафилококка (Staphylococcus epidermidis), гемолитического стафилококка (Staphylococcus hemolyticus), промежуточного стафилококка (Staphylococcus intermedius), козьего стафилококка (Staphylococcus caprae), которые впервые были обнаружены в молоке коз, но также присутствуют и в организме человека.
Золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus) – наиболее патогенный для организма, вид шаровидных, грамположительных бактерий из рода стафилококков. Назван по способности образовывать золотистый пигмент из группы каротиноидов, на бактериологических средах. Около 20-40% населения являются постоянными носителями этой бактерии, которая относится к бактериям-коменсалам (симбиотические отношения в пользу бактерии). Золотистый стафилококк колонизирует кожу и поверхности слизистых (носа, глотки и влагалища). Бактерия может вызывать широкий диапазон заболеваний, начиная с легких кожных инфекций: угри, импетиго, фурункул, карбункул, флегмона, ожогоподобный кожный синдром (синдром ошпаренных младенцев), абсцесс, до смертельно опасных заболеваний: пневмония, менингит, эндокардит, остеомиелит, инфекционно-токсический шок (ИТШ), сепсис. Он является одной из наиболее частых причин развития внутрибольничной инфекции (ВБИ), нередко вызывая послеоперационные раневые осложнения. Существуют резистентные к антибиотиколечению штаммы золотистого стафилококка, которые вызывают заболевания особенно трудно поддающиеся лечению.
Эпидермальный стафилококк (Staphylococcus epidermidis) – шаровидной или сферической формы бактерии, грамположительные, формирующие микрокапсулы для своей собственной защиты, способны размножаться в анаэробных и аэробных условиях, при температуре 30-37°C. Вирулентность организма обусловлена способностью к пленкообразованию, вследствие чего замедляется метаболизм в клетке и повышается устойчивость к воздействию противомикробных средств. Возбудитель широко распространен, обитает на предметах обихода, медицинском инструментарии и в различных локусах человеческого организма. Бактерии резистентны к большинству дезинфектантов, антибиотиков и антисептиков. Эпидермальный стафилококк наиболее часто является причиной госпитальной инфекции, к тому же, пациенты хирургических и реанимационных отделений, ввиду снижения иммунитета, в большей степени подвержены его влиянию. Наиболее часто поражается кожа и подкожно-жировая клетчатка, ЛОР-органы, органы дыхания, различные отделы зрительного анализатора, желчный пузырь и желчевыводящие пути, мочеполовые органы, кишечник, опорно-двигательный аппарат.
Гемолитический стафилококк (Staphylococcus hemolyticus) – условно-патогенный, грамположительный, неподвижный кокк, анаэроб, вызывает гемолиз (разрушение) эритроцитов, при снижении общей резистентности организма, вызывает инфекционно-воспалительные и гнойно-деструктивные процессы, часто поражает кожные покровы, слизистую оболочку респираторного (у больных хроническим тонзиллитом, гемолитический стафилококк высевается в 50% случаев; с острой ангиной – в 70% случаев), пищеварительного и урогенитального тракта. Особенно опасен для беременных женщин и новорожденных.
Промежуточный стафилококк (Staphylococcus intermedius) – являются частью нормальной микрофлоры кожи человека, мелких животных (кошек и собак) и птиц. Патогенность этого вида стафилококка длительное время считалась «промежуточной» между высоко патогенным золотистым стафилококком и редко патогенным эпидермальным стафилококком, чем и объясняется его название. Вызывает поверхностную и глубокую пиодермию кожи, отиты и инфицирование раневых поверхностей. Нередко штаммы стафилококка резистентны ко многим антибиотикам и инфекция, вызванная ими плохо поддается лечению.
Козий стафилококк (Staphylococcus caprae) – впервые был выделен из козьего молока. Это грамположительный, коагулазонегативный стафилококк, является бактерией-коменсалом кожных покровов человека и животных (коз). Вызывает мастит у коз и поражение опорно-двигательного аппарата у человека, особенно в условиях ослабления иммунитета.
Установлено, что 40-50% штаммов стафилококков, выделенных от здоровых людей, продуцируют стафилококковые энтеротоксины (CЭ), только один золотистый стафилококк образует 21 тип термостабильных СЭ. К наиболее часто выделяемым СЭ относятся: SEA, SEB, SEC, SED, SEE, SEI и TSST (токсин синдрома токсического шока), ранее обозначавшийся SEF (стафилококковый энтеротоксин «F»).
Стафилококковые энтеротоксины – это внеклеточные белки стафилококков, синтезируются в виде одной полипептидной цепи с дисульфидным мостиком, который играет важную роль в проявлении рвотного действия СЭ.
Наиболее часто стафилококками, особенно Staphylococcus aureus, колонизируются кожные покровы лиц, страдающих атопическим дерматитом. Секретируемые токсины проникают в организм через кожные повреждения, вызываемые атопическим дерматитом. В пораженных участках кожи плотность Sa (Staphylococcus aureus) – колоний в 100-1000 раз выше по сравнению с нормальными участками кожи пациентов с атопическим дерматитом. Кроме того, значительно более высокая частота колоний обнаруживается в нормальной коже пациентов с атопическим дерматитом, по сравнению с кожей здоровых субъектов. У детей с бронхиальной астмой, распространенность Sa-колонизации составляет 93%
Токсин синдрома токсического шока (Toxic Shok Syndrome Toxin – TSST-1) – это экзотоксин, обуславливающий развитие специфического симптомокомплекса, за счет стимулирования выделения интерлейкинов (IL-1 и IL-2) и фактора некроза опухоли (ФНО). ФНО представляет собой семейство цитокинов, вызывающее апоптоз (регулируемая клеточная гибель). Система включает в себя 18 белков-цитокинов. Синтез токсина синдрома токсического шока (ТСТШ) кодируют гены умеренных фагов (вирусов). Умеренные фаги – это инфекционные бактериофаги, которые способны вызывать фаговую инфекцию бактерий, они же переносят генетическую информацию от одной бактериальной клетки к другой. Основными продуцентами TSST-1 являются стафилококки I фагогруппы, бактерии которой вызывают наиболее тяжелые внутрибольничные инфекции (ВБИ): высоковирулентные и резистентные к антибиотикам и сульфаниламидным препаратам.
Штаммы стафилококков, продуцирующие ТСТШ, вызывают синдром токсического шока (СТШ), который является острым потенциально смертельным заболеванием, поражающим главным образом молодых женщин в период менструации, особенно при применении тампонов, иногда приводящий к летальному исходу. Впервые СТШ был описан в 1980 году у женщин, использующих в период менструаций вагинальные тампоны с полиакриловыми наполнителями, которые обладают повышенными адсорбирующими свойствами. Тампоны, увеличивая площадь заражения и поставляя в небольших количествах кислород, способствуют повышению продукции ТСТШ бактериями.
Синдром токсического шока может возникать у детей: в 18% случаев ТSST-1 обнаруживается в почках погибших от синдрома внезапной смерти младенцев. В 60% случаев, TSST-1 обнаруживается у детей с синдромом Кавасаки (некротизирующий системный васкулит с преимущественным поражением средних и мелких артерий).
Описаны случаи СТШ развившихся у рожениц после родов, а также при септицемии, вызванной коагулазоотрицательными стафилококками.
СТШ характеризуется широким спектром клинических и гистопатологических симптомов, таких, как лихорадка, температура может повышаться до 38-40°С, наблюдается скарлатиноподобная сыпь на ладонях и подошвах с последующей десквамацией (слущивание) эпителия, через 1-2 недели. У большинства больных наблюдается боль в горле, снижение артериального давления, диарея, рвота, головная боль, миалгия. Сыпь может приобретать вид пятнистой эритродермии, петехиальной или везикулезной сыпи. У больных наблюдается развитие шока (часто с летальным исходом). Кроме того, поражается печень, почки и миокард, развивается тромбоцитопения, коагулопатия, гипофосфатемия и гипокальциемия. Наиболее частое осложнение – острая дыхательная недостаточность и интерстициальная инфильтрация в легких.
Все известные типы стафилококковых энтеротоксинов (СЭ) обладают индивидуальной антигенной специфичностью. Перекрестные реакции наблюдаются между SEA и SEE и тремя подтипами SEC1, SEC2 и SEO3. TSST-1 относятся к семейству суперантигенов, способным вызывать массивную стимуляцию Т-клеток, анергию, иммунологическую толерантность, апоптоз и иммуносупрессию, что выражается в изменении реактивности организма. Данный токсин может быть фактором, обеспечивающим длительную персистенцию инфекционного агента у хозяина, т.к. временно подавляет иммунный ответ на другие антигенные раздражители.
Особый интерес представляет TSST-1 в его взаимосвязи с возникновением внезапной младенческой смертности, а также с интоксикацией у беременных женщин, у больных с возможным репрессированием иммунной системы, у наркоманов и больных СПИДом. Токсин синдрома токсического шока является сравнительно слабым антигеном, что осложняет приготовление и производство антител к нему. Токсин является сильным митогеном и при взаимодействии с Т-лимфоцитами, последние могут вызывать активацию до 50% Т-пула клеточного звена макроорганизма и выработку интерлейкинов, фактора некроза опухоли, интерферона. TSST-1 имеет уникальную способность преодолевать слизистую поверхность тканей, увеличивать проницаемость капилляров и вызывать синдром внутрисосудистого свертывания. Наиболее частой гистологической картиной при фатальных случаях является картина гиповолемического шока.
Ответной реакцией на попадание в организм суперантигена TSST-1, является массивная и быстрая выработка IgE. Антитела могут вызвать реакции, протекающие по различным типам развития иммунопатологических процессов. При развитии клинической картины с немедленным типом реакции, симптоматика появляется рано, проявляется бурно и нередко гиперреакция заканчивается летальным исходом. Часто аллергия является следствием уже перенесенного стафилококкового заражения и результатом действия накопившихся в организме токсинов. Клинически сенсибилизция бактериальным аллергеном сопровождается бронхоспастическим синдромом и кожными проявлениями: дерматитами и фурункулезом. Возможны проявления со стороны желудочно-кишечного тракта с развитием дисбактериоза, сопровождающиеся диареей, метеоризмом и болевым синдромом. У детей нередко развивается пузырчатка, характеризующаяся появлением большого количества пузырей по всему телу, заполненных серозным содержимым. Нередко, у новорожденных первого года жизни, может проявиться злокачественный вариант пузырчатки – болезнь Риттера. Это эксфолиативный дерматит, который представляет собой особую форму стафилодермии, характеризующуюся покраснением кожных покровов, (начиная с периоральной области) и образованием вялых пузырей с последующей отслойкой эпидермиса.
У лиц, страдающих гриппом, возможна колонизация стафилококком трахеи, с последующим развитием клиники острого и подострого трахеита. У больных СПИДом обнаруживается стойкое эритематозное шелушение, при шоке раневой этиологии обсемененность раны отсутствует. В указанных случаях обнаруживается атопический дерматит, синдром эксфолиативного отслоения эпидермиса, напоминающий болезнь «ошпаренной кожи».
Антитела класса IgE вызывают реакции немедленного типа, при которых симптомы развиваются непосредственно после контакта с аллергеном (от нескольких минут до 2-х часов).
Количественное определение специфических IgE позволяет оценить взаимосвязь между уровнем антител и клиническими проявлениями аллергии. Низкие значения этого показателя указывают на низкую вероятность аллергического заболевания. При выявлении высоких уровней специфических IgE возможно предсказать развитие аллергии в будущем и более яркое проявление ее симптомов. Концентрация IgE зависит от стадии заболевания, количества получаемого аллергена, проводимого лечения. Исходя из этого, рекомендуется повторять исследование в динамике при изменении симптомов и при контроле проводимого лечения.
Технология мультиплексного твердофазного иммунофлуоресцентного исследования ImmunoCAP разработана с целью обнаружения низких концентраций иммуноглобулинов. Технически это достигается с помощью уникальной конструкции реакционной лунки - капа (CAP). На дне капа размещается твердая фаза из особого пористого материала (производное бромциан-активированной целлюлозы, разработка компании Phadia) с иммобилизованным в ней антигеном. Благодаря такой уникальной технологии для сверхточной аллергодиагностики реагенты и автоматические анализаторы Phadia в настоящее время признаны во всём мире как "Золотой стандарт" и являются референс-системой, не имеющей аналогов в мире.
Выполнение анализа безопасно для пациента по сравнению с кожными тестами (in vivo), так как исключает контакт с аллергеном. Кроме того, прием антигистаминных препаратов и возрастные особенности не влияют на качество и точность исследования.
ПОДГОТОВКА К ИССЛЕДОВАНИЮ
Кровь рекомендуется сдавать утром, натощак (не принимать пищу в течение 8 часов перед анализом, воду пить можно), допустимо днем через 4 часа после легкого приема пищи. Не курить в течение 30 минут до исследования.
ПОКАЗАНИЯ
- Диагностика аллергических заболеваний, связанных с сенсибилизацией к энтеротоксину TSST-1 (контактный дерматит, атопический дерматит, бронхиальная астма, бактериальная экзема, крапивница, отек Квинке, аллергический риноконъюктивит, риносинусит, полипоз носа, анафилактический шок).
- Наличие симптомов аллергии, возникающих при возможном контактировании с энтеротоксинами различных видов стафилококков (покраснение, зуд и высыпания на коже, слезотечение, сыпь, зуд и отек губ, языка, глотки, нёба, ангионевротический отек, отек гортани, кашель и бронхоспазм, анафилактическая реакция).
- Атопия в анамнезе у детей и взрослых при развитии аллергической реакции.
- Поиск возможных аллергенов при анафилаксии с невыясненным генезом.
- Оценка риска развития аллергических реакций на различные виды стафилококков (преимущественно S. aureus, epidermidis, hemolyticus, caprae).
- Поливалентный характер сенсибилизации, когда нет возможности провести тестирование in vivo с предполагаемыми аллергенами.
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Интерпретация результатов содержит аналитическую информацию для лечащего врача. Лабораторные данные входят в комплекс всестороннего обследования пациента, проводимого врачом и не могут быть использованы для самодиагностики и самолечения.
Положительные результаты тестирования свидетельствуют о наличии сенсибилизации, отсутствие специфических IgE не исключает аллергической реакции на энтеротоксин синдрома токсического шока - TSST-1 (Toxic Shok Syndrome Toxin). Все полученные результаты должны интерпретироваться только в контексте анамнестических данных.
Исследование предполагает количественное определение в крови специфических антител, иммуноглобулинов класса E, появляющихся при наличии аллергической реакции на энтеротоксин - TSST-1 (Toxic Shok Syndrome Toxin).
Значение показателя, кЕдА/л | Класс выраженности аллергических реакций | Уровень аллергенспецифических антител IgE |
0 - 0,35 | 0 | Отсутствует |
0,351 - 0,69 | 1 | Низкий |
0,70 - 3,49 | 2 | Средний |
3,5 - 17,49 | 3 | Высокий |
17,5 - 49,99 | 4 | Очень высокий |
50,0 - 100,0 | 5 | Насыщенно высокий |
Больше 100,0 | 6 | Крайне высокий |
Причины повышения уровня специфических IgE:
Причины снижения уровня специфических IgE
При повторном исследовании (в динамике) уровень специфических IgE может снижаться по следующим причинам:
- ограничение или исключение контакта с аллергеном;
- проведение медикаментозного лечения;
- отсутствие чувствительности к данному аллергену.